Клінічні випробування нового методу генної терапії гемофілії B, обумовленої недостатністю фактора згортання крові IX, призвели до перших успіхів: лікування допомогло запобігти раптовим кровотечам у 10 пацієнтів і позбавила їх від необхідності регулярно вводити фактор згортання внутрішньовенно. Порівняно з минулими випробуваннями успіх терапії визначило використання мутантного фактора з одиничною амінокислотною заміною, яка збільшила активність ферменту в 10 разів. Результати випробувань, які фінансувала фармацевтична компанія Pfizer, опубліковані в, коротко про них повідомляє.
Гемофілія - досить рідкісне спадкове захворювання, при якому спостерігається порушення згортання крові, проте воно знаходиться на слуху завдяки тому, що їй страждали багато царських особливостей - нащадки королеви Вікторії. Найбільш поширена гемофілія типу А, обумовлена генетичною недостатністю фактора згортання крові VIII. Гемофілія типу B, яка і ховається під назвою «царська хвороба», зустрічається в 5-10 раз рідше (1 випадок на 50 тисяч осіб) і обумовлена отриманою від батьків або мутацією в гені, що кодує фактор згортання IX.
Не всі мутації призводять до недостатності фактору. Фактор IX - це фермент, який розщеплює інші компоненти в складному каскаді процесу згортання крові. Вчені виявили, що амінокислотна заміна аргініну на лейцин в позиції 388 призводить у збільшенню активності ферменту в 8-12 разів (форма під назвою Padua).
Раніше дослідники з компанії Spark Therapeutics провели експериментальну генну терапію з активною формою ферменту для трьох пацієнтів. Зараз вони повідомили про успіх першої фази клінічних випробувань. Десяти добровольцям вводили ген посиленого фактора IX у складі вірусного вектора (препарат під кодовою назвою SPK-9001). Ген повинен був вбудуватися в ДНК клітин печінки, які почали б виробляти фермент. Дослідження додатково профінансував Pfizer.
До початку експерименту пацієнти страждали від раптових кровотечей, у тому числі крововиливу в суглоби, з частотою приблизно раз на місяць, а для запобігання кровотечі їм необхідно було один-три рази на тиждень вводити в кров рекомбінантний фермент. Власний фермент продукувався у них в кількості менше двох відсотків від норми.
Після одноразового введення пацієнтам адено-асоційованих вірусних частинок, що містять ген фактора IX, рівень ферменту в крові всіх пацієнтів зріс до рівня 14-81 відсоток від норми (в середньому, 33 відсотки). Експерти оцінили стан пацієнтів через рік після введення гена - у дев'яти осіб припинилися спонтанні крововиливи, а восьми більше не потрібна замісна терапія. Для решти двох пацієнтів необхідна доза ферменту істотно знизилася. Ніяких серйозних побічних ефектів терапії виявлено не було.
Спроби вилікувати гемофілію за допомогою генної терапії робляться з 1990-х років, однак це перші успішні випробування препарату подібного роду. У попередніх дослідженнях продукція ферменту у пацієнтів виявлялася невисокою (не більше шести відсотків від норми), або швидко зменшувалася з часом. Ключовим моментом у цьому дослідженні стало використання надактивної форми ферменту, яке допомогло знизити необхідну дозу вірусних частинок до 10 разів. Це не тільки допоможе уникнути небажаних імунних реакцій, але й має здешевити собівартість препарату.
Нещодавно ми розповідали про першого пацієнта, якому для відновлення синтезу ферменту в печінці ввели в організм генетичну конструкцію для редагування геному.